01.序言
长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA),是一类长度大于nt、生物来源广泛、具有高度保守性的RNA分子。lncRNA起初被认为是基因组转录的“噪音”,是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能。
然而,近年来的研究表明,lncRNA参与了X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰,核内运输等多种重要的调控过程,lncRNA的这些调控作用也开始引起人们广泛的。
哺乳动物基因组序列中4%~9%的序列产生的转录本是lncRNA(相应的蛋白编码RNA的比例是1%),虽然近年来关于lncRNA的研究进展迅猛,但是绝大部分的lncRNA的功能仍然是不清楚的。因此本研究利用转录组测序阐述了不同类型的山羊皮肤色素形成中lncRNA的表达谱。
02.实验材料
以渝东白山羊和酉州黑山羊作为实验材料,取受孕天的山羊的背部和腹部皮肤做研究。
03.实验方法
1.RNA的抽提及文库构建(去核糖体的方法)
2.测序:IlluminaHiSeq0
3.数据分析:对测序结果进行生物信息学分析
04.结果分析
1、山羊胚胎皮肤中lncRNA的鉴定及分析
通过测序共得到84.2Gbcleanreads,分析发现6.29%()的转录本无参考数据库。利用软件CNCI,CPC,Pfam-scan,和PhyloCSF得到了个lncRNA,进行深入分析。这些lncRNA可以分为3个亚型:基因间lncRNA(intergeniclincRNAs,个)、内含子型lncRNA(introniclncRNA,个)和反义lncRNA(anti-senselncRNAs,个)。
从基因结构和表达水平上对3个亚型的lncRNAs进行初步分析,结果表明,introniclncRNA的转录本长度最长,anti-senselncRNAs次之,intergeniclincRNAs最短;从外显子数量方面,anti-senselncRNAs的数量最多,分布范围最广;而introniclncRNAs在基于FPKM(fragmentsperkbforamillionreads)的表达量方面的表达量最高。以上结果表示不同亚型的lncRNAs在山羊的基因组中具有不同的功能。
ComparativeanalysisofthethreesubtypesoflncRNAs.Thetranscriptlength(a),exoncount(b),andexpressionlevel(c)ofthreesubtypesoflncRNAswere土方治疗白癜风北京哪家治疗白癜风最好
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